論文分享｜群體感應(yīng)調(diào)控GefB蛋白抑制副溶血性弧菌運(yùn)動(dòng)及生物膜形成機(jī)制解析

發(fā)布時(shí)間：2025-02-18　來源：新芝生物　瀏覽量：0

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研究摘要

　　副溶血弧菌是導(dǎo)致食用海鮮后胃腸炎爆發(fā)的主要致病菌之一。環(huán)二鳥苷酸(c-di-GMP)是廣泛存在于細(xì)菌中的第二信使，可控制多種細(xì)菌行為，包括致病機(jī)制、生物膜的形成和運(yùn)動(dòng)能力。而GefB蛋白(VPA1478)以存在GGDEF結(jié)構(gòu)域?yàn)樘卣鳎梢种聘比苎【娜杭\(yùn)動(dòng)能力。研究發(fā)現(xiàn)，刪除了GefB基因的副溶血弧菌產(chǎn)生了一系列的顯著變化：c-di-GMP水平下降，生物膜形成減少，而游泳和群集運(yùn)動(dòng)能力卻得到了增強(qiáng)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，GefB不僅參與了鞭毛相關(guān)基因的抑制，還激活了那些負(fù)責(zé)胞外多糖產(chǎn)生的基因。值得注意的是，GefB與其相鄰基因VPA1477共同構(gòu)成一個(gè)名為vpa1477-gefB的轉(zhuǎn)錄單元，并且這個(gè)單元受到兩種群體感應(yīng)調(diào)節(jié)劑AphA和OpaR的協(xié)同控制。具體來說，在細(xì)菌細(xì)胞密度較低的情況下，AphA會(huì)促進(jìn)vpa1477-gefB的表達(dá);而在高細(xì)胞密度條件下，OpaR則起到抑制作用。這一系列研究成果為我們深入理解副溶血弧菌內(nèi)部復(fù)雜的c-di-GMP代謝網(wǎng)絡(luò)及其調(diào)控機(jī)制提供了寶貴的線索。

MGC系列微生物生長曲線分析儀的應(yīng)用

　　為了確定GefB基因缺失是否會(huì)對(duì)副溶血弧菌的生長產(chǎn)生影響，研究人員使用了MGC-200微生物生長曲線分析儀進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

　　實(shí)驗(yàn)中，副溶血弧菌RIMD2210633在心浸液肉湯中培養(yǎng)至OD600達(dá)到1.4，然后將該菌液作為種子菌液，以1：1000的比例接種到心浸液肉湯或者海生菌肉湯中，然后分裝到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔含有200μL菌懸液，每個(gè)菌株設(shè)置12個(gè)生物學(xué)重復(fù)，37℃培養(yǎng)。MGC-200每30分鐘自動(dòng)檢測(cè)一次OD600值，以監(jiān)測(cè)細(xì)菌的生長情況。

應(yīng)用數(shù)據(jù)

　　研究發(fā)現(xiàn)無論在下心浸液肉湯(圖A)還是在海生菌肉湯(圖B)中，野生型(WT)和GefB基因缺失(ΔgefB)的副溶血弧菌的生長率沒有明顯差異，這表明GefB基因的缺失不會(huì)直接影響副溶血弧菌的基本生長特性。

結(jié)論

　　MGC系列微生物生長曲線分析儀具有氣體環(huán)境監(jiān)控、高通量培養(yǎng)、全自動(dòng)檢測(cè)以及實(shí)時(shí)顯示生長曲線等的功能，整個(gè)過程無需人工頻繁取樣，也無需人員值守，大大降低了污染風(fēng)險(xiǎn)，真正實(shí)現(xiàn)了人力的解放和研究效率的提升，將成為您科研路上的得力助手。